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紫外可見分光光度計原理及應(yīng)用

更新時間：2024-08-06    點(diǎn)擊次數(shù)：2417

紫外可見分光光度計

    紫外可見分光光度計原理是：

    分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息?？梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。

    根據(jù)Lambert-Beer定律：A=εbc，（A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)b為液池厚度，c為溶液濃度）可以對溶液進(jìn)行定量分析。

    你可以用紫外可見分光光度計測定定三種農(nóng)藥的波長在某溶液中的大、小吸收波長。

    配制溶液－在光譜檢測項(xiàng)下進(jìn)行－調(diào)整檢測光譜范圍及速度--掃描光譜圖--吸光度大處對應(yīng)波長為大吸收波長，吸光度小處對應(yīng)的波長為小吸收波長。

    1.光源燈;2.濾光片;3.球面反射鏡;4.入射狹縫;5.保護(hù)玻璃;6.平面反射鏡;7.準(zhǔn)直鏡;8.光柵;9.保護(hù)玻璃;10.出射狹縫;11.聚光鏡;12.試樣室;13.光門;14.光電管.

    紫外可見分光光度計原理:

    由光源燈(1)發(fā)出連續(xù)輻射光線,經(jīng)濾光片(2)和球面反射鏡(3)至單色器的入射狹縫(4)聚焦成像,光束通過入射狹縫(4)經(jīng)平面反射鏡(6)到準(zhǔn)直鏡(7)產(chǎn)生平行光,射至光柵(8)上色散后又以準(zhǔn)直鏡(7)聚焦在出射狹縫(10)上形成一連續(xù)光譜,由出射狹縫選擇射出一定波長的單色光,經(jīng)聚光鏡(11)聚光后,通過試樣室(12)中的測試溶液部分吸收后,光經(jīng)光門(13)再照射到光電管(14)上.調(diào)整儀器,使透光度為100%,再移動試樣架拉手,使同一單色光通過測試溶液后照射到光電管上.如果被測樣品有光吸收現(xiàn)象,光量減弱放大器處理,將光能的變化程度通過數(shù)字顯示器顯示出來.可根據(jù)需要直接在數(shù)字顯示器上讀取透光度(T),吸光度(A)或濃度(C).

    基本操作:

    (1)通電---儀器自檢----預(yù)熱20min;

    (2)用鍵設(shè)置測試方式:透射比(T),吸光度(A),已知標(biāo)樣濃度方式(C)和已知標(biāo)樣濃度斜率(K)方式;

    (3)波長選擇:用波長調(diào)節(jié)旋鈕設(shè)置所需的單色光波長;

    (4)放樣順序:打開樣品室蓋,在1~4號放置比色皿槽中,依次放入%T校具(黑體),參比液,樣品液1和樣品液2.

    (5)校具(黑體)校"0.000":將%T校具(黑體)置入光路,在T方式下按"%T"鍵,此時儀器自動校正后顯示"0.000"

    (6)參比液校"100"%T或"0.000"A:將參比液拉入光路中,按"0A/100%T"鍵調(diào)0A/100%T,此時儀器顯示"BLA",表示儀器正在自動校正,校正完畢后顯示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完畢,可以進(jìn)行樣

    品測定.

    (7)樣品測定:將兩樣品液分別拉入光路中,此時若在"T"方式下則可依次顯示樣品的透射比(透光度)若在"A"方式下,則顯示測得的樣品吸光度.

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